دوره 7، شماره 2 - ( 1395 )                   جلد 7 شماره 2 صفحات 60-50 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print

Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Hajihassan Z, Hosseini S K, Zomorodipour A. Codon Optimization and Comparison of Recombinant Human Activin A Expression in BL21(DE3)pLysS, BL21(DE3) Rosetta gami and BL21(DE3) Bacterial Hosts. JMBS 2016; 7 (2) :50-60
URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-1055-fa.html
حاجی حسن زهرا، حسینی سید کاظم، زمردی پور علیرضا. بهینه‏سازی رمزه و مقایسه‏ی بیان فاکتوررشد اکتیوین A بصورت نوترکیب در میزبان‏های باکتریایی BL21(DE3) ، BL21(DE3)pLysS وRosetta gami BL21(DE3). زیست‌فناوری مدرس. 1395; 7 (2) :50-60

URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-1055-fa.html

بهینه‏سازی رمزه و مقایسه‏ی بیان فاکتوررشد اکتیوین A بصورت نوترکیب در میزبان‏های باکتریایی BL21(DE3) ، BL21(DE3)pLysS وRosetta gami BL21(DE3)
زهرا حاجی حسن* 1، سید کاظم حسینی2 ، علیرضا زمردی پور3
1- هیات علمی دانشگاه تهران، تهران
2- کارشناس ارشد فارغ التحصیل از دانشکده علوم و فنون نوین دانشگاه تهران، تهران
3- هیات علمی پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران
چکیده:   (10350 مشاهده)
پروتئین اکتیوینA متشکل از دو دایمر βA بصورت یک پری-پرو-پروتئین با طول 426 آمینواسید سنتز می شود که پس ازحذف بخشهای پری و پرو، پروتئین بالغ با طول 116 آمینواسید حاصل می‌شود. این پروتئین که اولین بار از مایع فولیکولی گوسفند بعنوان یک محرک قدرتمند برای تولید هورمون FSH جداسازی شد، دارای عملکردهای گوناگونی مثل حفظ و بقای سلول های عصبی، آپوپتوز، رشد و تمایز در انسان می باشد. از آنجاییکه پروتئین اکتیوینA دارای کاربردهای متعددی در زمینه پزشکی مانند تمایز سلول های بنیادی، ترمیم زخم، درمان بیماری های تحلیل عصبی مانند آلزایمر و ...است برای اولین‏بار در این تحقیق در سه سویه‏ی متفاوت باکتری E.coli بیان شد. از آنجاییکه پروتئین مذکور در ساختار فعال و عملکردی خود دارای پیوندهای دی‏سولفیدی است، محیط احیا کننده‏ی سیتوپلاسم E.coli برای بیان آن مناسب نمی‌باشد لذا، محیط اکسید کننده‌ی پری‏پلاسم جهت تولید آن همراه با تاخوردگی صحیح مورد توجه قرار گرفت. در این تحقیق، cDNA ژن اکتیوین A انسانی بدست آمده از بانک اطلاعاتی NCBI پس از بهینه‌سازی رمزه به همراه پپتید نشانه تغییریافته آنزیم آلفا آمیلاز باکتری باسیلوس لیکنی فورمیس بومی ‌ایران در وکتور بیانی pET21b(+)، ساب کون و سپس به روش ترنسفورماسیون به سویه‌های BL21(DE3)pLysS ،BL21(DE3)Rosetta gami و BL21(DE3) انتقال یافت. پس از بیان همزمان با استفاده از القاگر IPTG ، محتوای پروتئینی استخراج شده از هر سه سویه‏ با استفاده از تکنیکهای SDS-PAGE ، دات بلات و وسترن بلات با یکدیگر مقایسه گردید. نتایج نشان دهنده بیان در هر سه سویه باکتریایی بویژه در Rosetta gamiو DE3 می باشد.
واژه‌های کلیدی: اکتیوین A، پپتید نشانه آنزیم آلفا آمیلاز
متن کامل [PDF 1837 kb]   (4693 دریافت)    
نوع مقاله: کامل پژوهشی | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی
دریافت: 1394/4/4 | پذیرش: 1394/11/17 | انتشار: 1395/7/1
ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA
بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.