دوره 4، شماره 2 - ( 1392 )                   جلد 4 شماره 2 صفحات 38-29 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print

Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
- -, Behmanesh M, - -, - -. Cloning and Expression of ATP Sulfurylase Gene from an Iranian Strain of Thermophile Geobacillus. JMBS 2013; 4 (2) :29-38
URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-10665-fa.html
رحیمی اسمعیل، بهمنش مهرداد، نیکخواه مریم، صادقی ایمان. کلونینگ و بیان ژن ATP سولفوریلاز از یک سوش ایرانی باکتری ژئوباسیلوس گرمادوست. زیست‌فناوری مدرس. 1392; 4 (2) :29-38

URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-10665-fa.html

کلونینگ و بیان ژن ATP سولفوریلاز از یک سوش ایرانی باکتری ژئوباسیلوس گرمادوست
اسمعیل رحیمی1 ، مهرداد بهمنش* 2، مریم نیکخواه3 ، ایمان صادقی1
1- گروه ژنتیک، دانشکده علوم زیستی،دانشگاه تربیت مدرس
2- دانشگاه تربیت مدرس- دانشکده علوم زیستی، تهران
3- گروه نانوبیوتکنولوژی، دانشکده علوم زیستی،دانشگاه تربیت مدرس
چکیده:   (14945 مشاهده)
خلاصه آنزیم آدنوزین تری فسفات سولفوریلاز ( ATPS ) دربسیاری از انواع موجودات وجود دارد. نقش های فیزیولوژیکی مختلفی در موجودات مختلف به آنزیم ATPS نسبت داده شده که می‌توان به جذب و احیای سولفات و بازیابی پیروفسفات اشاره کرد. همچنین آنزیم دارای کاربردهای صنعتی و آزمایشگاهی متنوعی است. هدف این مطالعه کلون و بیان ژن تولید کننده پروتئین نوترکیب ATPS ازیک سوش ژئو باسیلوس ایرانی بود. بعد از جداسازی و تعیین سوش باکتری ژئوباسیلوس کواستافیلوس ، DNA ژنومی آن استخراج شد. با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن ATPS، ژن مورد نظر از رویDNA ژنومی تکثیر شد. نتیجه انجام PCR ژن ATPS به صورت یک باند 1188 جفت بازی بر روی ژل آگاروز مشاهده شد. سپس محصول PCR تخلیص و داخل وکتور کلونینگ کلون شد. باند مربوطه پس از کلونینگ توالی یابی شد و نتیجه بررسی همولوژی آن در بانک اطلاعاتی NCBI تایید کرد که قطعه کلون شده مربوط به ژن ATPSاست. ژن مورد نظر در پلاسمید بیانی pET 28a ساب کلون شد. امکان بیان پروتئین نوترکیب ATPS در باکتری BL21(DE3)ازروی ORF کلون شده با استفاده از ژل SDS-PAGEبررسی شد. آنالیز پروتئین بیان شده بر روی ژل SDS-PAGE یک باند 47.5 کلیو دالتونی را نشان داد. سنجش فعالیت آنزیمی پروتئین مورد نظر به روش لومینسانس ATP نشان داد که پروتئین نوترکیب دارای فعالیت می‌باشد. این اولین مطالعه در رابطه با کلون، بیان و تعیین فعالیت آنزیمی ژن ATPS از باکتری ژئوباسیلوس کواستافیلوس می‌باشد.
واژه‌های کلیدی: آدنوزین تری فسفات سولفوریلاز ( ATPS )، پیروفسفات، ژئوباسیلوس کواستافیلوس، پروتئین نوترکیب و لومینسانس ATP
متن کامل [PDF 444 kb]   (6697 دریافت)    
نوع مقاله: کامل پژوهشی | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی|ژنتیک
دریافت: 1391/8/24 | پذیرش: 1392/7/1 | انتشار: 1393/11/12
ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA
بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.