جستجو در:
دوره 11، شماره 2 - ( 1399 )
جلد 11 شماره 2 صفحات 247-241 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Moghaddam P, Zahmatkesh A, Airian S, Bagheri M, Mahravani Behbahani H, Aghaiypour K. Cloning and Expression of the Gene Encoding Antigenic Regions of 3D Non-Structural Protein of Foot-and-Mouth Disease Virus. JMBS 2020; 11 (2) :241-247
URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-31972-fa.html
URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-31972-fa.html
مقدم پروین، زحمت کش آزاده، آیریان سعید، باقری معصومه، مهروانی بهبهانی همایون، آقایی پور خسرو. کلونینگ و بیان ژن کدکننده ی نواحی آنتی ژنی پروتئین غیرساختاری 3D ویروس بیماری تب برفکی. زیست‌فناوری مدرس. 1399; 11 (2) :241-247
پروین مقدم1 
، آزاده زحمت کش* 
2، سعید آیریان1 ، معصومه باقری3 ، همایون مهروانی بهبهانی4 ، خسرو آقایی پور5
، آزاده زحمت کش* 2، سعید آیریان1 ، معصومه باقری3 ، همایون مهروانی بهبهانی4 ، خسرو آقایی پور5
1- گروه آموزشی سلولی- مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران ، ایران.
2- عضو هیات علمی موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی ، a.zahmatkesh@rvsri.ac.ir
3- بخش ژنومیکس و مهندسی ژنتیک، موسسه‌ی تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات، ترویج و آموزش کشاورزی، کرج، ایران.
4- بخش تولید واکسن تب برفکی، موسسه ی تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، ترویج و آموزش کشاورزی، کرج، ایران.
5- بخش ژنومیکس و مهندسی ژنتیک، موسسه ی تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، ترویج و آموزش کشاورزی، کرج، ایران.
2- عضو هیات علمی موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی ، a.zahmatkesh@rvsri.ac.ir
3- بخش ژنومیکس و مهندسی ژنتیک، موسسه‌ی تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات، ترویج و آموزش کشاورزی، کرج، ایران.
4- بخش تولید واکسن تب برفکی، موسسه ی تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، ترویج و آموزش کشاورزی، کرج، ایران.
5- بخش ژنومیکس و مهندسی ژنتیک، موسسه ی تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، ترویج و آموزش کشاورزی، کرج، ایران.
چکیده: (2453 مشاهده)
تب برفکی (FMD) بیماری بسیار واگیردار و ویرانگر است که به سرعت انتشار می‌یابد و خسارات اقتصادی زیادی را موجب می‌شود. یکی از روشهای مهم تشخیص بیماری و خصوصا تفکیک حیوان واکسینه شده از حیوان مبتلا به این بیماری، استفاده از پروتئینهای غیرساختاری بعنوان آنتی ژن در کیتهای تشخیصی الایزا میباشد. هدف از مطالعهی حاضر، کلونینگ توالی ژنی و بیان نواحی آنتیژنی پروتئین غیر ساختاری 3Dبه عنوان یکی از گزینههای تشخیصی میباشد. برای تکثیر ژن کدکنندهی نواحی آنتیژنی پروتئین 3D ویروس تب برفکی، آغازگرهای اختصاصی دارای جایگاه برشی آنزیم های NdeI و EcoRI طراحی شد و واکنش زنجیره ای پلیمراز انجام شد. ژن برش خورده توسط این دو آنزیم، به ناقل PET21a+ انتقال داده شد و در باکتری های اشرشیاکلی DH5α ترنسفورم شد. آزمایشات کلونی-PCR و برش آنزیمی بر روی کلونی های حاصل انجام و حضور ژن هدف تایید شد. توالی ژنی نیز پس از توالییابی تایید شد. برای تولید آنتی ژن نوترکیب، وکتور بیانی نوترکیب به میزبان بیانی باکتری اشریشاکلی BL21 انتقال داده شد. باکتری های حاوی ژن نوترکیب، با IPTGالقا شدند و بیان پروتئین نوترکیب با استفاده از روش SDS PAGE تایید شد. وزن مولکولی پروتئین نوترکیب موردنظر حدود 24 کیلودالتون بوده و از آن میتوان در طراحی کیت تشخیصی الایزا استفاده کرد
نوع مقاله: پژوهشی اصیل |
موضوع مقاله:
بیوتکنولوژی مولکولی
دریافت: 1398/1/25 | پذیرش: 1398/11/26 | انتشار: 1399/3/20
دریافت: 1398/1/25 | پذیرش: 1398/11/26 | انتشار: 1399/3/20
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |