دانشگاه تربیت مدرس زیست فناوری 2322-2115 3 2 2012 11 21 A Gene Transfer System Establishment Coexpressingof eGFP and HIF-1α in Mesenchymal Stem Cells Based on Lenti Viral Vectors ساخت سامانه انتقال ژن بیان‌کننده‌ی هم‌زمان ژن‌های eGFP و HIF-1α در سلول‌های بنیادی مزانشیمی با وکتورهای لنتی‌ویروسی 51 66 22282 FA وحید رزبان پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری سحر خواجه دانشگاه تربیت مدرس عباس صاحبقدم لطفی پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری مسعود سلیمانی دانشگاه تربیت مدرس حسین احمدی مرکز قلب دانشگاه تهران، تهران، ایران محمد معصومی پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری Journal Article Stem cell therapy has been introduced as an innovative and promising treatment in Ischemic diseases. Mesenchymal stem cells are considered for cell therapy to some extent due to their immunemodulatory, differentiation potential, feasibility of isolation and proliferation properties. Stem cells, after transplantation, often encounter harsh and hypoxic environment in ischemic tissues, which leads to cell death and decreased therapeutic efficiency. On the other hand, the fate of stem cell viability and differentiation is still an ambiguous issue in cell therapy regenerative medicine. To overcome this problem, Hypoxic/Ischemic preconditioning has been reported as a powerful tool with beneficial effects on cell survival. The reported master regulator in this process is a transcription factor known as HIF-1α. This study aimed to over-express HIF-1α in mesenchymal stem cells along with eGFP by using lenti viral vectors. Bisistronic expression of eGFP and HIF-1α provides the possibilities of tracking the transplanted cells and mimicking the hypoxic conditions for genetically modified stem cells for future animal model studies. برای درمان بیماری‌های ایسکمیک، سلول‌درمانی به‌عنوان روشی جدید و مؤثر مطرح است. سلول‌های بنیادی مزانشیمی به دلایل مختلف مانند امکان جداسازی و تکثیر آسان بدون ازدست دادن توانایی تمایزی و تنظیم سامانه ایمنی جایگاه ویژه‌ای دارند. سلول‌های بنیادی پس از تزریق در بافت‌های ایسکمیک با شرایط سخت کمبود اکسیژن رو به رو می‌شوند که با مرگ بیشتر سلول‌ها همراه است. به همین دلیل کارایی سلول درمانی بسیار کاهش می‌یابد. همچنین سرنوشت این سلول‌ها از نظر زنده ماندن و تمایز مورد بحث است. در مطالعات متعددی تأثیر مفید پیش‌آماده‌سازی سلول‌ها با هیپوکسی برای سلول درمانی بافت‌های ایسکمیک گزارش شده است و تنظیم‌کننده‌ی اصلی در این فرایند، فاکتور رونویسی HIF-1α است. در این پژوهش، ژن HIF-1α با استفاده از لنتی‌ویروس‌ها به سلول‌های بنیادی مزانشیمی منتقل می‌شود تا با افزایش بیان آن، شرایط پیش‌آماده‌سازی با هیپوکسی، شبیه‌سازی شود. از طرفی پروتئین eGFP نیز به صورت Bisictronic همراه HIF-1α بیان می‌شود. به این ترتیب هم می‌توان اثر شبیه‌سازی پیش‌آماده‌سازی هیپوکسی روی سلول‌های بنیادی مزانشیمی را بررسی کرد و هم پیگیری و بررسی سرنوشت سلول‌های تزریق‌شده در مدل‌های حیوانی با استفاده از مارکر GFP،انجام می‌شود. https://biot.modares.ac.ir/article_22282_f3e03b54a1b603f4ce5f16f1f84890ac.pdf