1- گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران،
2- گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران، تهران، بزرگراه جلال آل احمد، پل نصر، دانشگاه تربیت مدرس ، hasannia@modares.ac.ir
3- گروه زیستفناوری دامی، پژوهشکده زیستفناوری کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیستفناوری تهران، ایران،
چکیده: (5469 مشاهده)
پروتئینهای مورفوژنتیک استخوانی (BMPs) متعلق به سوپرفامیلی فاکتور ترنسفورمکننده رشد بتا هستند. این مولکولها در رشد و تکوین جنینی و همچنین تمایز سلولهای مختلف نقش ایفا میکنند. در این خصوص دو مولکول همودایمر BMP-۲ و BMP-۷ نقش مهمی در تشکیل اکتوپیک استخوان دارند بهطوری که دو نوع نوترکیب آن بهصورت استفاده اکتوپیک در دسترس هستند. بعد از اتصال همودایمر BMP-۲ به گیرنده خود در سطح سلول، تجمع همودایمرهای نوع I و II گیرنده آن منجر به ایجاد پاسخ بیولوژیک در داخل سلول میشود. علیرغم وجود انواع نوترکیب BMP-۲ و BMP-۷ بهدلیل خطرات ناشی از استفاده از آنها هنوز استراتژی استفاده از انواع آندوژن از طریق به دامانداختن با آنتیبادیهای مونوکلونال در محل ضایعه استخوانی در اولویت برنامههای تحقیقاتی است. روش جایگزین دیگر بهجای استفاده از آنتیبادیهای مونوکلونال استفاده از گیرندههای طبیعی این لیگاند در بدن است. در این رابطه با توجه به Kd مناسب اتصال بخش اکتودمین گیرنده II مولکول BMP-۲ در این پروژه اقدام به بیان و تخلیص این قسمت با هدف به دامانداختن BMP-۲ اندوژن شد. قطعه پروتئینی اکتودمین گیرنده نوع II در میزبان باکتریایی بیان و تخلیص شد که با ارزیابی CD این پروتئین نوترکیب حاکی از ساختار مشابه با نوع طبیعی آن بود. همچنین ارزیابی اتصال آن به لیگاند BMP-۲ با الایزا مورد بررسی قرار گرفت و در ادامه Kd آن محاسبه شد. براساس نتایج بهدستآمده، بخش اکتودمین گیرنده نوع دو میتواند با ویژگی اتصال مناسب در غلظت نانومولار به BMP-۲ متصل شود و در مطالعات بعدی میتواند بهعنوان یک جایگزین بهجای آنتیبادی مونوکلونال برای به داماندازی مولکولهای BMP آندوژن مورد استفاده قرار گیرد.
نوع مقاله:
پژوهشی اصیل |
موضوع مقاله:
بیوتکنولوژی دارویی دریافت: 1397/7/1 | پذیرش: 1397/8/14 | انتشار: 1398/6/30