جستجو در:
دوره 2، شماره 1 - ( 1390 )
جلد 2 شماره 1 صفحات 0-0 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Gardaneh M, Deheshkar Farahani N, Maghsoudi N, Attar H, Rahimi Shamabadi A, Gharib E. Generation of High-titer Recombinant Lentiviruses Carrying Nurotrophic Factor GDNF Gene and Their Transfer to Human Astrocytes. JMBS 2011; 2 (1)
URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-3560-fa.html
URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-3560-fa.html
گردانه موسی، دهشکار گونه فراهانی نفیسه، مقصودی نادر، عطار حسین، رحیمی شم آبادی عباس، قریب احسان. تولید لنتی ویروسهای نوترکیب ناقل ژن فاکتور نوروتروفیک GDNF با تیتر بالا و انتقال آنها به آستروسیتهای انسانی. زیست‌فناوری مدرس. 1390; 2 (1)
موسی گردانه* 
1، نفیسه دهشکار گونه فراهانی2 ، نادر مقصودی3 ، حسین عطار3 ، عباس رحیمی شم آبادی4 ، احسان قریب2
1، نفیسه دهشکار گونه فراهانی2 ، نادر مقصودی3 ، حسین عطار3 ، عباس رحیمی شم آبادی4 ، احسان قریب2
1- اتوبان تهران-کرج- بلوار پژوهش- پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک، تهران
2- دانشجو، تهران
3- عضو هیئت علمی، تهران
4- کارشناس، تهران
2- دانشجو، تهران
3- عضو هیئت علمی، تهران
4- کارشناس، تهران
چکیده: (12686 مشاهده)
لنتی ویروسها از جمله موثرترین ویروسهای نوترکیب برای انتقال ژن به سلولها و بافتهای پستانداران بشمار میرود. این مطالعه شامل دو بخش اساسی است: (1) بررسی کارائی ستونهای پروتئینی در تولید لنتی ویروسهای نوترکیب با تیتر بالا و (2) بکارگیری این ستونها درتولید لنتی ویروسهای نوترکیب حامل ژن فاکتورنوروتروفیک GDNF. در بخش اول مطالعه با استفاده از دو ناقل انتقال (حامل GFP یا Jred) تولید لنتی ویروس نوترکیب کردیم. با انتقال سوپرناتان سلولهای ترانسفکت شده به ستونهای پروتئینی Amicon و سانتریفوژ ستونها بیش از 99% سوپرناتان را جدا کردیم تا استوکی در حجم 500 μl از سوپرناتان غلیظ شده و مملو از ویریونها بدست آید. با افزودن رقتهای مختلف این استوک ویروسی به سلولهای هدف، ترانسدوکشن سلولی با موفقیت انجام شد بطوریکه ترانسژنهای گزارشگر در 100% سلولها مشاهده شد. متقابلا تست بخش رقیق سوپرناتان منجر به هیچگونه بیان ژن که نشانگر فعالیت ویروسی باشد نگردید. تولید تیتر بالای ویروسی با روش فیلتراسیون مزبور برای انتقال موفقیت آمیز ژنها اهمیت دارد و از نظر هزینه، حجم کار و زمانبری بر آنها ارجحیت دارد. در بخش دوم این مطالعه، توالی مربوط به فاکتور مهم GDNF را به سازه لنتی ویروسی پیوند زده و به همان روش بالا ویروسهای تیتر بالا تولید کردیم. با انتقال این ویروسها به آستروسیتهای انسانی توانستیم افزایش بیان ژن GDNF را در سطح mRNA بمیزان 3 برابر بدست آوریم. این نتایج نشان دادکه لنتی ویروسهای حامل GDNF را میتوان با روش جاری در تیتر بالا تولید کرده و برای مطالعات تمایزی و حفاظت نورونی مورد استفاده قرار داد.
نوع مقاله: مقاله مستقل |
موضوع مقاله:
ژنتیک|بیوتکنولوژی|Agricultural Machinery
دریافت: 1389/9/13 | پذیرش: 1390/2/4 | انتشار: 1390/6/28
دریافت: 1389/9/13 | پذیرش: 1390/2/4 | انتشار: 1390/6/28
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |