جستجو در مقالات منتشر شده
۱ نتیجه برای Pdl-۱
یعقوب fathollahi، بهاره دبیر منش، خسرو خواجه، عاطفه خداکرمی،
دوره ۱۵، شماره ۱ - ( ۱-۱۴۰۲ )
چکیده
نقاط بازرسی ایمنی، مولکول هایی هستند که سیستم ایمنی را تنظیم می‌کنند. برخی از سلول های تومور می توانند لیگاندهای متصل شونده به این نقاط بازرسی ایمنی را برای فرار از پاسخ های ایمنی ضد توموری بیان کنند. برخی از عوامل، مانند آنتی بادی ها، می توانند این نقاط بازرسی را مهار کنند. هدف از این مطالعه بیان یک دیابادی دو منظوره جدید در فضای پری پلاسمیک باکتری E. coli BL۲۱(DE۳) برای مهار همزمان دو نقطه بازرسی ایمنی، پروتئین مرتبط با ۴ (CTLA ۴) و لیگاند متصل شونده (PD L۱) است.
دیابادی دو منظوره بر اساس ژن نواحی متغیر آنتی‌بادی‌های anti PD-L۱ و anti CTLA ۴ طراحی و جهت بیان درباکتری E. coli BL۲۱(DE۳) بهینه سازی و در پلاسمید بیانی pET۲۱ کلون شد. پس از ترنسفرم کردن به داخل سویه بیانی E. coli BL۲۱(DE۳) اثر شرایط بیانی مختلف کشت مورد بررسی قرار گرفت، بیانDia-۲۱ با وزن مولکولی ۵۵کیلو دالتون با الکتروفورز ژل SDS-PAGE و وسترن بلات تأیید شد. بهترین شرایط برای بیان پری پلاسمیک به فرم محلول بیان با ۰/۵ میلی مولار IPTG در دمای ۲۳ درجه سانتی گراد محیط کشتLB و زمان ۱۸ ساعت به دست آمد. پروتئین بیان شده سپس با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی نیکل آگارز با بازده نهایی ۰/۴ میلی گرم در لیتر تخلیص و نهایت میل ترکیبی برهمکنش پروتئین خالص شده توسط Cell-ELISA بررسی شد.
پروتئین دیابادی نوترکیب در یک سیستم باکتریایی بیان و خالص‌سازی و برهمکنش پروتئین دیابادی نوترکیب باگیرنده سطح سلولی PDL-۱ از طریق Cell-Elisa بررسی شد.
