1- گروه تولید و تحقیق واکسنهای باکتریایی پزشکی، موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران، گروه تولید و تحقیق واکسنهای باکتریایی پزشکی، موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران. کد پستی: 3197619751 ، Noofeli1234@yahoo.com
2- گروه زیستشناسی سلولی و ملکولی، دانشکده علوم، واحد بروجرد، دانشگاه آزاد اسلامی، بروجرد، ایران،
3- گروه زیستشناسی، دانشکده علوم، واحد بروجرد، دانشگاه آزاد اسلامی، بروجرد، ایران،
چکیده: (5773 مشاهده)
اهداف: بوردتلا پرتوسیس باکتری گرممنفی و هوازی اجباری است که عامل بیماری سیاهسرفه و پاتوژن انحصاری انسان است. سیاهسرفه یک عفونت حاد تنفسی است و در نوزادان منجر به مرگ میشود. هدف این پژوهش، بررسی ژنهای خانهدار در سویه واکسینال بوردتلا پرتوسیس با تکنیک تایپینگ توالی چندلوکوسی (MLST) بود.
مواد و روشها: در پژوهش تجربی حاضر، چهار نمونه سویه واکسینال بوردتلا پرتوسیس ۱۳۴ و ۵۰۹ و دو نمونه استاندارد Tohama I و ۱۸۳۲۳ جمعآوری شدند. بعد از انجام آزمایشهای بیوشیمیایی، کشت و جداسازی آنها، تخلیص DNA ژنومی با روش فنل- کلروفرم و آنالیز توسط روش MLST انجام شد. بعد از تعیین توالی، تجزیه و تحلیل توسط نرمافزارهای استاندارد Clustalw ۲، MEGA ۵.۰۴ و DNASIS Max ۳ صورت گرفت. شباهت توالی نوکلئوتیدهای ژن ۱۶S rDNA سویهها به کمک نرمافزار BLAST با توالیهای ثبتشده در پایگاه اطلاعاتی ژنومی GenBank برای مقایسه و تعیین میزان تشابه توالیها انجام شد.
یافتهها: با توجه به باندهای ایجادشده و همچنین ترادف بازی حاصله، ژنهای خانهدار سویههای واکسینال بوردتلا پرتوسیس مورد تایید قرار گرفت. نتایج واکنش PCR برای ژنهای Pgm، Icd، Gly A و Tyr B نشان داد که همه نمونهها دارای ژنهای خانهدار با وزن ملکولی حدود ۵۰۰جفتباز بودند.
نتیجهگیری: در بررسی ژنهای خانهدار سویه واکسینال بوردتلا پرتوسیس با تکنیک MLST، سویههای واکسن سیاهسرفه (موسسه رازی؛ ایران) با سریهای استاندارد جهانی مطابقت دارد و هیچ گونه تغییر یا انحرافی در ژنهای مورد مطالعه رخ نداده است.
موضوع مقاله:
بیوتکنولوژی کشاورزی دریافت: 1395/8/15 | پذیرش: 1396/9/25 | انتشار: 1397/3/31