دوره 7، شماره 2 - ( 1395 )                   جلد 7 شماره 2 صفحات 70-60 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print

Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Najavand S. Immobilization of AaCel9a endoglucanase on chitosan macrobeads. JMBS 2016; 7 (2) :60-70
URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-8513-fa.html
رحیمی زاده پرستو، نژاوند سعید، پاژنگ محمد، امانی قدیم علیرضا، چاپارزاده نادر، یونسی فرشته سادات. تثبیت آنزیم اندوگلوکاناز AaCel9A برروی ماکروبیدهای کیتوزانی. زیست‌فناوری مدرس. 1395; 7 (2) :60-70

URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-8513-fa.html

تثبیت آنزیم اندوگلوکاناز AaCel9A برروی ماکروبیدهای کیتوزانی
پرستو رحیمی زاده1، سعید نژاوند* 2، محمد پاژنگ3، علیرضا امانی قدیم4، نادر چاپارزاده4، فرشته سادات یونسی5
1- دانشجو/دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
2- هیئت علمی- دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز
3- هیات علمی/دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز
4- هیات علمی/ دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
5- دانشجو/ دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
چکیده:   (10041 مشاهده)
سلولاز آنزیمی پرکاربرد در صنایع مختلف می باشد. تثبیت سلولاز یکی از روش‌های پایدارسازی آن است که نه تنها امکان جداسازی آنزیم از واکنش، بلکه امکان استفاده مجدد از آن را فراهم می‌سازد و در نتیجه هزینه استفاده آنزیم در صنعت به طور قابل توجهی کاهش می‌یابد. استفاده از کیتوزان به عنوان بستر جهت تثبیت آنزیم و استفاده گسترده آن در فرآیند‌های صنعتی همواره مورد توجه بوده است. ویژگی‌های فوق العاده از جمله زیست سازگاری، زیست تخریب پذیری و غیر سمی بودن آن، کیتوزان را بستری مناسب جهت فرآیند تثبیت معرفی می‌کند. در این مطالعه توالی ژنی کد کننده آنزیم اندوگلوکاناز AaCel9A در وکتور بیانی pET28a(+) همسانه سازی شد. نتایج حاصل از تعیین توالی مؤید قرارگیری صحیح قالب ژنی AaCel9A در وکتور بود. سپس وکتور حاوی ژن به سلول های مستعد اشریشیا کلی سویه BL21 منتقل شده و بیان پروتئین در آن ها القا شد. بیان آنزیم با استفاده از روش الکتروفورز SDS-PAGE و سنجش فعالیت آنزیم تایید و با ستون نیکل آگارز تخلیص بعمل آمد. ساخت ماکروبیدهای کیتوزان با روش ژله ای شدن صورت گرفت. مولکولهای آنزیم با استفاده از لینکرهای گلوتارآلدئیدی به صورت کووالان به بستر متصل و تایید تثبیت آنزیم توسط FTIR و نیز سنجش فعالیت آنزیمی از ماکروبیدهای حاوی آنزیم انجام پذیرفت. آنالیز نتایج نشان داد که بهترین شرایط برای تثبیت کوالان آنزیم بر روی بستر در غلظت گلوتارآلدئید 7/0% و بافر سدیم فسفات (7 pH) می باشد. همچنین آنالیز برادفورد و سنجش فعالیت آنزیمی مؤید تثبیت 85% از مولکول‌های آنزیم برروی بستر بود.
واژه‌های کلیدی: اندوگلوکاناز AaCel9A، پایدار سازی، تثبیت، کیتوزان
متن کامل [PDF 448 kb]   (3437 دریافت)    
نوع مقاله: مقاله استخراج شده از پایان نامه | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی
دریافت: 1394/4/13 | پذیرش: 1394/11/17 | انتشار: 1395/7/1
ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA
بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.