بیان آنتی‌بادی تک دمینی ضد VEGF انسانی از طریق نمایش سطحی در E. coli با استفاده از‌ دمین انتهای آمین پروتئین هسته‌زایی یخ (INP)

الحفیان, سلیم; رضایی, زینب; شاهنگیان, سیده‌شیرین; حسن ساجدی, رضا

جستجو در:

همه

صفحات وب

کتب

نشریات

مرکز نشر آثار علمی

زیست‌فناوری

دوره 14، شماره 2 - ( 1402 ) جلد 14 شماره 2 صفحات 0-0 | برگشت به فهرست نسخه ها

Mendeley

Zotero

RefWorks

Alhafyan S, Rezaei Z, Shahangian S, H. Sajedi R. Cell-surface displayed expression of single domain antibody against VEGF in E. coli using N-terminal domain of ice nucleation protein (INP). JMBS 2023; 14 (2)
URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-67042-fa.html

الحفیان سلیم، رضایی زینب، شاهنگیان سیده‌شیرین، حسن ساجدی رضا. بیان آنتی‌بادی تک دمینی ضد VEGF انسانی از طریق نمایش سطحی در E. coli با استفاده از‌ دمین انتهای آمین پروتئین هسته‌زایی یخ (INP). زیست‌فناوری مدرس. 1402; 14 (2)

URL: http://biot.modares.ac.ir/article-22-67042-fa.html

بیان آنتی‌بادی تک دمینی ضد VEGF انسانی از طریق نمایش سطحی در E. coli با استفاده از‌ دمین انتهای آمین پروتئین هسته‌زایی یخ (INP)

سلیم الحفیان¹

، زینب رضایی¹

، سیده‌شیرین شاهنگیان²

، رضا حسن ساجدی^*

1- گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران،
2- گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه گیلان، رشت، ایران،
3- گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، تهران-دانشگاه تربیت مدرس-دانشکده علوم زیستی ، sajedi_r@modares.ac.ir

چکیده: (641 مشاهده)

آنژیوژنز در بسیاری از فرآیندهای فیزیولوژیک و پاتولوژیک از جمله رشد تومور دخالت دارد و VEGF مهمترین فاکتور در این فرایند محسوب میشود. امروزه تولید آنتیبادی های تک دمینی (VHH) با ویژگی مهار فاکتورهای رشد در تومورهای سرطانی یکی از راهکارهای جدید درمان سرطان میباشد. در پژوهش قبلی ما مشخص شد VHHهای شتری تهیه شده با استفاده از نمایش فاژی علیه VEGF در مهار آن نقش اساسی ایفا میکند. در این بین VHHی که دارای بیشترین تمایل به جایگاه اتصال به VEGF در بین دیگر اعضا کتابخانه فاژیVHH ها تهیه شده بود، انتخاب شد. با توجه به کارایی بیان سطحی E. coli با استفاده از موتیف لنگری پروتئین هسته‏زایی یخ (INP)، از این سیستم برای بیان پروتئین استفاده شد. از آنجا که در اتصال INP به سطح سلول فقط دمین انتهای آمینی نقش دارد، در طراحی سازه ژنی از 537 جفت باز ابتدایی ژن InaK استفاده شد. همچنین با قراردادن جایگاه برش آنزیم پروتئاز TEV بین INP وVEvhh10، امکان جداسازی موفقیت آمیز VEvhh10 از سطح سلول باکتری فراهم گردید. بیان سطحی با استفاده از پلاسمید pET-21a حاوی INP و VEvhh10علیه VEGF انجام شد. نتایج نشان داد دنباله INPگزینه مناسبی برای بیان سطحی VEvhh10در E. coli میباشد. پس از تولیدVEvhh10 نوترکیب، جداسازی و تخلیص با استفاده از سانتریفیوژ و شستشوی متعدد انجام گرفته و اتصال آن به VEGF مورد بررسی قرار گرفت. اتصال موفقیتآمیزVEvhh10 به VEGF نشان داد که پروتئین نوترکیب حاصل میتواند برای کاربردهای درمانی و تشخیص بالینی بیماران در آینده مورد استفاده قرار گیرد.

واژه‌های کلیدی: نمایش سطحی در باکتری، پروتئین هسته‌زایی یخ، VHH، آنژیوژنز، فاکتور رشد اندوتلیال رگی

متن کامل [PDF 1178 kb] (206 دریافت)

نوع مقاله: پژوهشی اصیل | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی مولکولی
دریافت: 1401/11/4 | پذیرش: 1401/11/30 | انتشار: 1403/3/6

ارسال پیام به نویسنده مسئول

بازنشر اطلاعات
	این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.